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上皮組織細(xì)胞株的主要培養(yǎng)方法概述

原載自:m.xrpalvh.cn[行情動(dòng)態(tài)]  2020-10-20  瀏覽次數(shù):1052

   上皮組織細(xì)胞株包括腺上皮,是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分。又由于癌起源于上皮組織,故上皮細(xì)胞培養(yǎng)特別受到重視。但上皮細(xì)胞培養(yǎng)中?;祀s有成纖維細(xì)胞,培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)速度往往超過(guò)上皮細(xì)胞,并難以純化,同時(shí)上皮細(xì)胞難以在體外長(zhǎng)期生存,而且體外培養(yǎng)周期較長(zhǎng)。因此細(xì)胞純化、延長(zhǎng)體外培養(yǎng)壽命和縮短體外培養(yǎng)周期是上皮細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵。
  以皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞(角朊細(xì)胞)為例,角朊細(xì)胞是構(gòu)成皮膚表皮的主要細(xì)胞,其正常的增殖、分化維系著表皮正常的結(jié)構(gòu)和生理功能。角阮細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)是建立角骯細(xì)胞庫(kù)*的步驟,也是復(fù)合人工皮膚組織工程學(xué)研究的先決條件。
  上皮角朊細(xì)胞細(xì)胞株的主要培養(yǎng)方法可分:
  1.細(xì)胞滋養(yǎng)層和血清培養(yǎng)法
  利用經(jīng)6GryY射線照射失去增殖能力的鼠3T3細(xì)胞作為滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)角朊細(xì)胞的方法為代表,其特征是3T3細(xì)胞滋養(yǎng)層和使用含F(xiàn)CS的培養(yǎng)液。這種培養(yǎng)方法一般可使角朊細(xì)胞分裂50次左右,缺點(diǎn)是細(xì)胞培養(yǎng)體系需血清、涂層板和細(xì)胞滋養(yǎng)層,成本較高,操作繁瑣。
  2.組織塊法
  早前的角朊細(xì)胞培養(yǎng)方法是組織塊法,將手術(shù)切取的無(wú)菌皮膚修剪為1-3mm3大小組織塊,間距3-5mm排布在培養(yǎng)瓶底壁上,加入少量培養(yǎng)液,待組織塊貼附后(約2-3小時(shí)),加入培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)。角朊細(xì)胞由組織塊中游出,圍繞組織塊周?chē)L(zhǎng),呈同心圓狀。這種方法的確可以使角朊細(xì)胞在體外培養(yǎng)下存活增殖,但缺點(diǎn)是無(wú)法避免成纖維細(xì)胞的污染。

 

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